新聞中心
急性缺血性腦卒中（AIS）是導致人類死亡和傷殘的重要因素，解析其內源性的修復機制是近年AIS治療的熱點課題之一。先期研究表明，二甲基精氨酸二甲胺水解酶1（DDAH1）在多種疾病中，如心血管事件、非脂肪性肝病變中可作為應激性因子產生保護作用。但其對AIS作用的報道較少。僅在動物實驗模型上驗證了DDAH1通過調節不對稱性二甲基精氨酸（ADMA）含量減輕大鼠卒中后急性損傷；以及在細胞層面上檢驗出不依賴ADMA的方式調控神經生長因子（NGF）誘導的大鼠腎上腺嗜鉻瘤PC12細胞的分化作用。而對卒中后患者血液內DDAH1的臨床檢驗結果以及DDAH1對卒中的腦損傷修復作用均未見報道。
首都醫科大學基礎醫學院肇玉明副教授、宣武醫院腦血管病研究所羅玉敏教授和中國科學院大學生命科學院陸忠兵教授合作在“Acta Pharmaceutica Sinica B”發表題為“DDAH1 promotes neurogenesis and neural repair in cerebral ischemia”的文章。 作者對腦卒中患者血液內DDAH1變化與患者腦損傷程度相關性及其可能參與的卒中腦損傷的內在保護作用進行了分子機制探討。臨床研究發現，作為應激性保護因子，DDAH1在缺血性腦卒中患者血清中表達量與損傷程度呈現正相關；動物研究進一步表明: 缺血性腦卒中發生后DDAH1可能通過低氧誘導因子-1α/乙酰膽堿轉移酶（HIF-1α/ChAT）信號通路對受損的膽堿能神經進行再生性修復。顯然，這一新發現有望為缺血性卒中治療提供新分子靶點及新思路。 本文使用TissueGnostics公司TissueFAXS Plus全景組織掃描定量分析系統對小鼠腦組織進行多色免疫熒光圖像采集。借助Tissue Cytometry技術，對小鼠腦組織不同分區的目標陽性細胞的表達進行了精準定量分析。 本文中，作者建立了一種關于DDAH1的潛在治療及評估手段，發現DDAH1調節腦卒中損傷后，海馬中負責ACh合成的基因(Chat、Slc5a7、Slc18a3)和ACh濃度。本文作者在關鍵環節，數據校驗均采用多色免疫熒光（mIHC）技術，這種方案通過三級信號放大的原理，不但可以提升數據檢測的靈敏度，還在滿足數據校驗通量的前提下，極大提高了數據的可靠度與可信度。作者表示，文章最核心的意義在于，發現ACh介導下，DDAH1在成人神經再生的生態位中起重要作用，實現了原位空間特征信息的錨定。這種作用可能直接誘導NSCs增殖，間接促進NSCs分化為膽堿能神經元，進一步刺激周圍NSCs的增殖。增強的神經源性活性有助于突觸形成和功能恢復，以對抗中風損害，成為未來緩解及治療中風的潛在分子靶點。 Figure 3. DDAH1促進缺血損傷下神經干細胞（NSCs）的增殖。 (B)同側SVZ和SGZ中DDAH1和Nestin免疫熒光染色的代表性圖像。 (C)同側SVZ和SGZ中BrdU和DCX免疫熒光染色的代表性圖像。 (D, E)同側SVZ和SGZ的BrdU和DCX細胞統計分析(每組n=4)。 Figure 4. DDAH1促進缺血損傷下神經干細胞（NSCs）的神經分化。 (B)同側SVZ、紋狀體和DG中BrdU和NeuN免疫熒光染色的代表性圖像。 (C, D)同側紋狀體(C)和DG (D) BrdU和NeuN細胞的統計分析。 (E)同側SVZ、紋狀體和DG中BrdU和GFAP免疫熒光染色的代表性圖像。 (F, G)同側紋狀體和DG BrdU和GFAP細胞的統計分析。 (H, I)紋狀體和DG中BrdU、NeuN和GFAP的表達情況。 Figure 6. DDAH1增強腦卒中后神經發生有助于I1h/ R28d后認知功能恢復，但對運動功能恢復沒有作用。 (J)同側SVZ、紋狀體和DG BrdU和Neu免疫熒光染色的代表性圖像。 Figure 7.神經干細胞（NSCs）中DDAH1的條件敲除可消除腦卒中后神經發生活動并加重認知功能障礙。 (F)同側SVZ、紋狀體和DG中BrdU和NeuN/GFAP免疫熒光染色的代表性圖像 Figrure 9. DDAH1在損傷后23小時調節SVZ和SGZ 神經干細胞（NSCs）中ChAT的表達。 (A) SVZ和SGZ中ChAT和SOX2免疫熒光染色的代表性圖像。(B) (B, C) SVZ和SGZ中ChAT、SOX2細胞的統計分析(每組n=3)。
