日韩专区亚洲综合久久-日韩专区一区-日韩专区在线播放-日韩字幕在线-日韩综合

新聞中心

    技術干貨:一文讀懂菌液OD600測量

    圖片

        微生物和細胞生長的光密度(OD)測量是微生物學及生物發酵實驗室中最常用的方法之一,用于在進行蛋白表達或監測培養過程時確定收獲的最佳時間。細胞、細菌或酵母在液體培養基中的生長情況(細胞密度、細菌生長、酵母生長)通常通過測量600nm下的光密度(OD600)來獲得。OD600測量通常用于確定細菌培養物的生長階段,這些測量有助于確保在適當的細胞密度下收獲細胞。

    圖片

    圖片

        由于OD600測量的光密度是由光散射而非光吸收引起的,因此細胞的大小和形狀以及死細胞和碎片可能會增加光散射。因此,當在相同的儀器上測量時,處于相同密度水平(如Cells/mL)的不同細胞類型可能顯示出不同的OD600值。

        細菌細胞的生長通常經歷一系列連續的階段,包括滯后、對數、靜止和衰退。通常,應在對數期結束時收獲細胞,使用樣品的光密度OD600來確定何時達到這一時間點,是非常便捷的。在誘導或收獲之前,細胞通常常規生長至OD600達到約0.4。

    圖片

    朗伯-比爾定律與OD600


        朗伯-比爾定律,根據經驗將光的吸收與樣品的濃度聯系起來。該定律表明,光通過特定樣品的透射率(T=I/Io,其中I=出射光,Io=入射光)、特定化合物的消光系數(ε)、樣品中具有光吸收的物質的濃度(c)和光傳播的距離(d)之間存在對數關系。根據朗伯-比爾特定律,OD值與細菌濃度(C)或數量(N)具有類似的定義。然而,OD600的測量實際上是濁度的測量,因此,我們可以應用朗伯-比爾定律定律,但需要進行一些額外的考量,如樣品濁度(濃度)的適用范圍,設備收集非散射光的結構等。


    圖片

    OD600讀數的差異


        對于混濁的樣品,如細胞培養物,測量的吸光度的主要來源于光散射,而不是完全遵循朗伯-比爾定律中的分子吸收的原理。因此,測量取決于分光光度計的光學設置(比色皿和儀器出射狹縫狹縫之間的距離、單色器的性能、狹縫幾何形狀等),不同的儀器類型很可能會為相同的混濁樣品提供不同的OD 600讀數。因此,如果要比較不同分光光度計的結果,則必須首先使用兩種不同儀器上的相同樣本進行OD600值比較,并進行相關性的歸一化。


    圖片

    OD600校正值公式


        NanoPhotometer?或OD600 DiluPhotometer?等儀器默認“校正系數”為1,如使用相應方法進行調整,將有助于在不同設備之間提供可比較的結果。


    OD600校正因子= 設備1測量值 / 設備2測量值


        或者使用創建適當的校準曲線來采用更精確的方法,可以通過在不同濃度范圍內比較測量的OD600與預期的OD600來構建校準曲線。預期的OD600是通過使用替代技術(例如顯微鏡載玻片法)進行細胞計數,并使用經驗法則將1個OD600=5×108個cells/ml的大腸桿菌聯系起來。


    圖片

        通常建議使用試管或比色皿進行OD600測量,以確保讀數的穩定性,較大體積樣品提供了更大的濁度平均值,誤差相對較小。此外,為了防止菌體沉降過快,并給出隨時間變化的OD讀數,可向樣品中添加甘油。對于一些很小的樣品量要求,使用微滴進行測量,也是可行的,特別是NanoPhotometer?的樣品壓縮法,在液膜中測量,可避免液柱中顯著的沉降現象。但需注意在上樣前樣品的充分混勻。

     

        用于測量的儀器的線性范圍對于覆蓋培養物的整個生長周期至關重要,建議至少2.5 OD的OD限值以提供足夠的工作范圍。如果存在大量的死細胞,使結果模糊不清,則樣本可能在整個范圍內不是線性的。如果樣品仍然超出范圍,則可能需要稀釋;應仔細選擇參數以覆蓋整個所需區域,而不影響測量的線性度。


    圖片

        為了減少OD600測量所需的體積,并避免耗時且容易出錯的手動稀釋,可以使用特殊的比色皿。Implen的DiluCell?自動稀釋比色皿可降低樣品體積要求,并提供自動虛擬樣品稀釋。由于DiluCell?的獨特設計,光路從標準的10毫米減少到1毫米(DC 10)。根據朗伯-比爾定律,光程因子為10。使用DiluCell?自動稀釋可節省時間,并排除稀釋誤差和交叉污染。


    圖片

        德國Implen提供多種OD600測量解決方案,包括應用于基礎測量和高級工藝開發的不同機型,具有可靠的測量結果和豐富的軟件功能,以及合規性功能,能夠充分滿足不同用戶的需求。OD600測量,認準德國Implen。


    上一篇:APSB|TissueCytometry技術探索組織空間原位助力首都醫科大學肇玉明教授團隊發現DDAH1在神經再生生態位的作用    下一篇:Biacore實驗指南| 競爭分析類實驗,這么做更省力!

    微信公眾號

    久久国产精品自线拍免费| 精品视频在线观看一区二区| 欧美1区| 亚洲精品久久玖玖玖玖| 91麻豆精品国产综合久久久| 色综合久久久久综合体桃花网| 国产伦精品一区三区视频 | 91麻豆国产福利精品| 欧美一级视| 日日夜人人澡人人澡人人看免| 精品国产香蕉在线播出 | 日韩欧美一及在线播放| 国产伦精品一区三区视频 | 尤物视频网站在线观看| 成人免费一级纶理片| 国产麻豆精品视频| 欧美另类videosbestsex久久| 深夜做爰性大片中文| 精品视频一区二区三区免费| 国产高清在线精品一区二区 | 亚洲精品中文字幕久久久久久| 黄视频网站在线观看| 在线观看成人网 | 日韩女人做爰大片| 欧美a级大片| 国产网站免费| 国产网站免费| 欧美激情一区二区三区在线播放| 精品国产亚洲一区二区三区| 午夜在线亚洲男人午在线| 欧美日本免费| 亚洲第一视频在线播放| 国产麻豆精品hdvideoss| a级黄色毛片免费播放视频| 日韩欧美一及在线播放| 精品国产香蕉在线播出 | 欧美日本免费| 精品国产亚洲一区二区三区| 午夜在线亚洲男人午在线| 天天色色网| 国产视频久久久久| 精品国产三级a| 深夜做爰性大片中文| 青草国产在线| 黄视频网站在线观看| 精品国产亚洲一区二区三区| 成人免费观看视频| 可以免费在线看黄的网站| 日韩一级黄色| 久久精品店| 国产成人欧美一区二区三区的| 国产亚洲男人的天堂在线观看| 成人免费观看视频| 国产高清在线精品一区二区 | 在线观看成人网 | 你懂的福利视频| 91麻豆国产福利精品| 四虎论坛| 999久久久免费精品国产牛牛| 欧美一级视| 99久久精品国产高清一区二区| 成人在免费观看视频国产| 久久久久久久网| 青青青草影院 | 尤物视频网站在线观看| 国产视频久久久久| 国产91精品一区二区| 日韩专区在线播放| 亚洲精品中文字幕久久久久久| 日韩专区第一页| 久草免费在线视频| 精品久久久久久中文| 你懂的福利视频| 日本特黄特黄aaaaa大片| 尤物视频网站在线观看| 成人在免费观看视频国产| 成人免费一级纶理片| 日本伦理黄色大片在线观看网站| 欧美另类videosbestsex久久| 在线观看成人网 | 成人免费一级纶理片| 可以免费在线看黄的网站| 日韩专区第一页| 日韩免费在线视频| 99热精品在线| 日韩一级黄色| 亚欧乱色一区二区三区| 午夜家庭影院| 亚洲第一视频在线播放| 久久国产精品自线拍免费| 日韩免费在线视频| 成人在免费观看视频国产| 欧美国产日韩一区二区三区| 麻豆午夜视频| 国产视频久久久久| 国产麻豆精品视频| 九九热精品免费观看| 黄视频网站在线观看| 国产网站免费| 99热精品在线| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 日韩一级黄色| 欧美电影免费| 九九热精品免费观看| 国产精品自拍在线观看| 精品国产三级a| 一级毛片视频免费| 一级毛片视频免费| 精品视频一区二区三区免费| 国产一区二区精品| 国产一区二区精品| 免费国产在线视频| 欧美一级视| 精品国产亚洲一区二区三区| 日韩免费在线视频| 青青久久精品国产免费看| 九九干| 欧美a级大片| 欧美电影免费| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 精品毛片视频| 亚洲 国产精品 日韩| 亚洲精品中文字幕久久久久久| 一级毛片视频免费| 日本在线不卡视频| 91麻豆精品国产片在线观看| 午夜家庭影院| 天天做日日爱夜夜爽| 免费毛片播放| 亚洲第一视频在线播放| 成人高清免费| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 99久久精品国产高清一区二区| 日本在线不卡视频| 黄视频网站在线观看| 国产伦精品一区三区视频 | 精品视频在线观看一区二区| 久久精品店| 国产视频久久久久| 深夜做爰性大片中文| 亚欧乱色一区二区三区| 国产网站免费| 青青青草影院 | 国产网站免费| 999久久久免费精品国产牛牛| 亚洲精品中文字幕久久久久久| 99热精品在线| 日韩女人做爰大片| 四虎影视库| 精品视频在线看 | 欧美另类videosbestsex久久| 精品视频一区二区三区免费| 亚洲天堂免费| 999久久久免费精品国产牛牛| 日本在线不卡视频| 尤物视频网站在线观看| 日韩女人做爰大片| 你懂的福利视频| 成人免费福利片在线观看| 亚洲精品久久玖玖玖玖| 日韩中文字幕一区二区不卡| 精品在线观看一区| 午夜家庭影院| 麻豆午夜视频| 天天色色网| 久久精品店| 精品国产一区二区三区精东影业| 99热精品在线| 久久精品欧美一区二区| 四虎论坛| 深夜做爰性大片中文| 欧美a级大片| 日韩专区第一页| 日本在线不卡视频| 国产成人欧美一区二区三区的| 亚飞与亚基在线观看| 欧美激情中文字幕一区二区| 亚洲精品久久玖玖玖玖| 精品毛片视频| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 免费的黄视频| 尤物视频网站在线观看| 国产一区二区精品| 青青青草影院 | 深夜做爰性大片中文| 亚洲精品久久玖玖玖玖| 亚洲天堂免费| 亚飞与亚基在线观看| 精品视频在线观看一区二区| 日日夜人人澡人人澡人人看免| 国产亚洲男人的天堂在线观看| 日韩一级黄色| 国产一区二区精品| 国产高清视频免费观看| 青草国产在线| 天天做日日爱夜夜爽| 国产美女在线一区二区三区| 免费一级片网站| 美女被草网站| 日本免费乱理伦片在线观看2018|